中国科学院海洋所在牡蛎基因组编辑方面获进展

        中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室张琳琳团队搭建了一套基于电穿孔的Cas9/sgRNA复合物高通量递送和突变体快速检测的技术平台，实现了对牡蛎（Crassostrea gigas angulate）基因组中标记基因（β-tubulin）的高效编辑。相关研究成果发表于《Frontiers in Marine Science》。该团队研究采用前期研发的“长片段缺失镶嵌性突变技术”，通过同时电穿孔多个靶基因sgRNAs，研究在长牡蛎靶向基因中检测到超过300 bp的长片段缺失突变，使研究可以使用PCR和常规琼脂糖凝胶电泳对突变体进行快速筛选和基因分型。这种同时传递两个以上sgRNAs以获得长片段缺失的策略是显著的改进，简化了基因组编辑基因型检测的工作流程。此外，利用原位杂交和行为学分析等表型检测手段，研究在牡蛎G0代幼虫中观察到表型的镶嵌型突变（纤毛的缩短、缺失）和运动能力下降。这种镶嵌型突变有利于探究在G0代个体中对突变表型进行快速鉴别，同时能规避目标基因完全缺失导致的胚胎致死性。该研究可为今后基于CRISPR/Cas9基因组编辑技术在海洋贝类中开展基因功能研究提供有益参考。